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蔡司显微镜-拼图拼痕阴影的解决办法

分类:公司新闻 发布时间:2022-10-18 544次浏览

  宽场显微镜  宽场显微镜使用相机采集图像。当成像视野大于相机芯片的时候,就会...

  宽场显微镜

  宽场显微镜使用相机采集图像。当成像视野大于相机芯片的时候,就会出现暗角,最终导致拼图产生阴影,因此确保使视野小于芯片大小是避免阴影的关键。

  在宽场显微镜上,可以通过设置Acquisition ROI来改变成像视野大小。

  由于不同相机芯片大小有别,很难给出一个通用的参考值,因此建议只要视野略小于相机大小即可。具体可以参照下图

  

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  ▲ 图中黑色区域代表相机芯片,蓝色框代表视野大小。图中的蓝色框和黑色区域大小一样,代表视野和相机芯片大小一样。通过修改ROI数字,使得蓝色框(视野)略小于黑色区域(相机芯片)即可。

  共聚焦显微镜

  针孔 (pinhole)

  针孔的大小影响着可通过的光信号量,进而影响视野亮度。

  针孔越小,视野越暗,则越容易出现拼痕。因此建议在做拼图成像的时候,pinhole不小于1,并且可以根据实际情况适当往上微调。

  但是注意,针孔越大,光学分辨率越差,因此需要把握好平衡。

  放大倍数 (Zoom)

  在盘锦蔡司激光共聚焦显微镜(点击查看)上,当放大倍数越小,视野则越大,也更加容易出现暗角。

  因此建议在做拼图成像的时候,Zoom不小于1,并且可以根据实际情况适当往上微调。

  但是注意,Zoom越大,视野越小,需要做的拼图数更多,成像时间更长,因此需要把握好平衡。

  

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  ▲ 做拼图的时候共聚焦上需要确保针孔不小于1 Airy Unit,以及放大倍数不小于1。

  图像处理

  无论是宽场还是共聚焦,拼图拍完后都必须进行拼接 (Stitching) 图像处理,使不同的拼图连接在一起,消除错位。

  具体步骤:在ZEN Blue -> Image Processing -> 搜索”Stitching” -> 选择 “New Output” -> 点击Apply,即可生成一张拼接好的大视野图像。

  

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  当图像部分地方存在阴影的时候,可以尝试在Stitching处理中,选上 “Fuse tiles” 或者 “Correct Shading“ 或两者全选,来去除阴影。

  

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  ▲ Fuse tiles和Correct Shading处理以及处理前后对比图。

  以上就是拼图实验中,常见的导致拼痕、阴影的原因以及解决办法。如果按照以上方法处理后图像还是有很严重的拼痕或者阴影,可以联系我们4001500108的工程师解决哦。


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